1.A megfelelő sejtvonal kiválasztása
Amikor kiválasztja a megfelelő sejtvonalat a kísérlethez, vegye figyelembe a következő kritériumokat:
a.Fajok: A nem emberi és nem főemlős sejtvonalakra általában kevesebb biológiai biztonsági korlátozás vonatkozik, de végül a kísérlet eldönti, hogy egy adott faj tenyészetét használja-e.
b.Jellemzők: Mi a kísérlet célja?Például a májból és veséből származó sejtvonalak alkalmasabbak lehetnek a toxicitás vizsgálatára.
c. Korlátozott vagy folyamatos: Habár egy korlátozott sejtvonal közül választva több lehetőséget kínálhat a megfelelő funkció kifejezésére, a folyamatos sejtvonalakat általában könnyebb klónozni és fenntartani.
d. Normál vagy transzformált: A transzformált sejtvonalak általában nagyobb növekedési sebességgel és nagyobb oltási hatékonysággal rendelkeznek, folyamatosak, és kevesebb szérumot igényelnek a táptalajban, de fenotípusuk genetikai transzformáció révén maradandó változásokon ment keresztül.
e. Növekedési feltételek és jellemzők: Milyen követelményei vannak a növekedési sebességre, a telítési sűrűségre, a klónozási hatékonyságra és a szuszpenziós növekedési képességre?Például a rekombináns fehérjék nagy hozamú expresszálásához olyan sejtvonalakat kell kiválasztania, amelyek gyors növekedési sebességgel rendelkeznek, és képesek szuszpenzióban növekedni.
f.Egyéb kritériumok: Ha korlátozott sejtvonalat használ, elegendő készlet áll rendelkezésre?Teljesen jellemzett a sejtvonal, vagy magának kell ellenőriznie?Ha abnormális sejtvonalat használ, van-e megfelelő normál sejtvonal, amely használható kontrollként?Stabil a sejtvonal?Ha nem, milyen egyszerű klónozni és elegendő fagyasztott készletet előállítani a kísérlethez?
2. Szerezzen sejtvonalakat
Felépítheti saját tenyészetét elsődleges sejtekből, vagy dönthet úgy, hogy kereskedelmi vagy non-profit beszállítóktól (azaz sejtbankoktól) megvásárolja a kialakult sejttenyészeteket.A jó hírű beszállítók kiváló minőségű sejtvonalakat kínálnak, amelyek integritását gondosan tesztelték, és biztosítják, hogy a tenyészet szennyeződésektől mentes legyen.Javasoljuk, hogy ne kölcsönözzenek tenyészeteket más laboratóriumoktól, mert nagy a sejttenyészet szennyeződésének kockázata.Függetlenül a forrástól, kérjük, győződjön meg arról, hogy minden új sejtvonalat teszteltek mikoplazma szennyeződés szempontjából, mielőtt elkezdi használni.
Feladás időpontja: 2023.02.01